Облигатно анаэробные микроорганизмы превышает максимальное значение. Тест-система «Фемофлор»: количественный и качественный анализ биоценоза влагалища. Лечение гарднереллеза у беременных

Влагалищный биоценоз представлен ассоциацией микроорганизмов, обеспечивающих поддержание местного иммунитета и гомеостаза организма женщины в целом.

В зависимости от множества факторов состав биоценоза может динамически изменяться, но тем не менее стремится оставаться в равновесном состоянии. Для характеристики влагалищной микрофлоры используются несколько лабораторных методов, в том числе и "Фемофлор". Что это за анализ, какие виды его используют в повседневной практике врача, разберем подробнее.

Показать всё

1. Микрофлора влагалища

К изменениям биоценоза влагалища приводят такие факторы, как:

1. 1 Гормональный статус женщины;
2. 2 Возраст;
3. 3 Образ жизни, характер питания;
4. 4 Половое поведение и смена полового партнера;
5. 5 Способ предохранения;
6. 6 Иммунный статус;
7. 7 Акушерско-гинекологический анамнез;
8. 8 Реализация репродуктивной функции;
9. 9 Прием лекарственных средств (гормональных, антибактериальных);
10. 10 Экстрагенитальная патология.

Все эти факторы так или иначе сказываются на составе влагалищной флоры женщины, при нарушении ее баланса возможно развитие гинекологических заболеваний.

Важен не столько качественный, сколько количественный состав микробиоты (особенно для факультативной флоры).

В ходе исследований в рамках проекта "Микробиом человека" (2012г., США) была доказана ведущая роль не только состояния равновесия микрофлоры урогенитального такта, но и дисбиотических нарушений в реализации репродуктивной функции и качества жизни женщины в целом.

Было исследовано и доказано влияние инфекций урогенитального тракта, дисбиотических процессов в этиологии самопроизвольных выкидышей, преждевременных родов, внутриутробного инфицирования и патологий развития плода, бесплодия, привычного невынашивания беременности.

Одним из самых информативных анализов в работе акушер-гинеколога является исследование состава влагалищной флоры, как качественного, так и количественного.

Один из рутинных и самых недорогих методов – это микроскопия мазка. Как бы не был хорош этот метод, он имеет ряд недостатков:

1. 1 Человеческий фактор. Оценка мазка осуществляется лаборантом, поэтому результат мазка на флору зависит от опытности и квалификации персонала лаборатории.
2. 2 Не всегда есть гарантия правильности забора мазка, иногда не получается захватить достаточное количество патогенной флоры.
3. 3 При микроскопии обнаруживаются не все инфекционные агенты (например, при не видны , ). Для их обнаружения необходимы дополнительные исследования, что затягивает постановку диагноза.

В настоящее время в РФ разработана специальная система для оценки влагалищной флоры методом ПЦР «здесь и сейчас» – тест-система «Фемофлор». Этот метод широко используется в амбулаторных условиях.

2. История возникновения

Система Фемофлор разработана и апробирована в 2008-2009 годах компанией «ДНК-Технологии» в России. Главная ее задача – исследование состава микрофлоры урогенитального тракта женщин.

В 2014 году данная разработка признана победителем премии «Призвание». На данный момент метод широко используюется в акушерско-гинекологической практике, включен в список оказания высокотехнологичной помощи по профилю «Акушерство и гинекология».

3. Что такое Фемофлор?

Фемофлор - это тест-система для определения количественного и качественного состава влагалищной флоры методом обнаружения ДНК бактерий, увеличения их количества и идентификации в пределах реального времени.

Фемофлор позволяет:

1. 1 Определить общую бактериальную массу.
2. 2 Дать количественную оценку нормофлоры.
3. 3 Дать количественную оценку факультативной флоры, ее корреляцию с общим составом бактерий.
4. 4 Выполнить контроль забора материала для исследования.

4. Биохимические основы

В основе проведения анализа с помощью набора реагентов «Фемофлор» лежит полимеразная цепная реакция (ПЦР) с амплификацией (увеличение количества копий) ДНК.

Любая элементарная ПЦР состоит из следующих этапов:

1. 1 Расплетение нитей ДНК.
2. 2 Отжиг – то есть присоединение коротких нитей ДНК-затравок (праймеров), которые необходимы для дальнейшего образования нуклеиновых кислот.
3. 3 Комплементарное достраивание новых нитей – образование новой цепи ДНК.

Для успешного проведения ПЦР-диагностики необходимы следующие материалы:

1. 1 ДНК-матрица, то есть участок, подлежащий амплификации;
2. 2 Два комплементарных праймера (затравки);
3. 3 ДНК-полимераза термостабильная – фермент, необходимый для катализа реакции полимеризации;
4. 4 Дезоксирибонуклеофосфаты – строительный материал;
5. 5 Соли магния – для работы ДНК-полимеразы;
6. 6 Буферный раствор.

Проще говоря, не важно сколько исследуемого материала было взято. Даже минимальное его количество будет увеличено в количестве и идентифицировано.

5. Наборы реагентов

Набор реагентов «Фемофлор» состоит из:

• Комплекс для обнаружения общего количества бактерий;
• Комплекс для обнаружения состава и количества нормофлоры (Lactobacillus spp.);
• Комплекс для обнаружения состава и количества факультативной флоры (состав зависит от комплектации Фемофлор-16 (17), Фемофлор-8 (9), Фемофлор-4, Фемофлор Скрин).

С помощью набора «Фемофлор» можно проконтролировать правильность течения процесса с помощью контрольной пробирки, а также правильность забора материала с помощью пробирки с комплексом для обнаружения генома человеческой ДНК.

В каждую реакционную смесь системы Фемофлор введены специальные ДНК-зонды, несущие в себе флуоресцентную составляющую (метку) в сочетании с гасителем флуоресценции.

Действие гасителя прекращается при наличии специфических продуктов разрушения ДНК-зонда, после чего возникает флуоресценция. Чем больше этих специфических ампликонов, тем ярче будет свечение (флуоресценция).

Чтобы увеличить специфичность и чувствительность реакции, применяют метод «горячего» старта. При этом реакционная смесь разделена на 2 прослойки с помощью парафина. Слои смешиваются и превращаются в реакционную смесь только при плавлении парафина в детекторе, исключая неспецифический отжиг праймеров.

6. Преимущества и недостатки метода

Чувствительность метода при оценке дисбиотических нарушений составляет 88%, а специфичность – 89%. При диагностике бактериального вагиноза чувствительность Фемофлора выше и достигает порядка 95%.

Таким образом, основным преимуществом тест-системы Фемофлор является его достаточная чувствительность и специфичность в отношении ведущих патогенов урогенитальной сферы женщины, независимо от их видовой принадлежности (бактерии, грибы, вирусы, простейшие).

К плюсам метода можно отнести:

1. 1 Быстроту и простоту исполнения;
2. 2 Минимальную зависимость от человеческого фактора, имеющийся контроль правильности взятия мазка;
3. 3 Возможность оценки количества и качества факультативной и нормальной флоры, возможность оценки соотношения между разными видами микроорганизмов;
4. 4 Одновременное обнаружение различных возбудителей (бактерий, простейших, вирусов, грибов);
5. 5 Отсутствие противопоказаний к назначению данного метода.

Недостатки метода:

В зависимости от комплектации различают несколько видов теста Фемофлор (см. таблицу ниже).



Таблица 1 - Виды анализа Фемофлор: Фемофлор 4, Фемофлор 8 (Фемофлор 9), Фемофлор 16 (Фемофлор 17)

8. Оценка и расшифровка результатов

8.1. Оценка общей обсемененности

Оценивается общее количество бактерий в исследуемом материале – общая бактериальная масса. Нормальные ее значения колеблются в пределах 10 8 -10 9 ГЭ/образец.

Снижение этого показателя ниже 10 5 чаще всего свидетельствует о проведенном курсе лечения (применение антибиотиков и антисептиков). Повторить такой анализ рекомендуется через 14 дней.

Снижение показателя у женщин в перименопаузе или постменопаузе является доказательством атрофических процессов.

8.2. Исследование нормофлоры влагалища

В идеале нормальная флора женщины представлена микроорганизмами Lactobacillus spp, их количество равно общей бактериальной массе, то есть 10 8 -10 9 ГЭ/образец.

В ходе анализа проводится корреляция общего количества бактериальной массы, лактобацилл и доли факультативной флоры.

При нормоценозе доля лактобацилл составляет не менее 95%. Снижение ее до 80% говорит о , а до 20% - о крайне выраженном нарушении состава флоры.

8.3. Исследование состава факультативной флоры

При выявлении нарушений биоценоза необходимо анализировать превалирующую долю сопутствующей флоры.

Если преобладает факультативно-анаэробная флора, то расценивается как аэробный, если облигатно-анаэробная – то как анаэробный.

При одинаковом их соотношении говорят о смешанной этиологии.



Таблица 2 - Нормальные значения влагалищной микрофлоры в зависимости от вида микроорганизма



Таблица 3 - Патогенная флора, выявляемая при выполнении Фемофлор Скрин. Для просмотра кликните по таблице

9. Показания к проведению анализа

В целом ограничений к назначению исследования влагалищного мазка нет.

Но чаще всего Фемофлор назначают для:

1. 1 Идентификации возбудителя при инфекционном процессе (появление патологических белей, их неприятный запах) и назначения адекватной этиотропной терапии.
2. 2 Изучения состава влагалищной флоры, ее качественной и количественной составляющих.
3. 3 Постановки диагноза при расхождении клинических и лабораторных данных.
4. 4 Скрининга при беременности (во всех триместрах).
5. 5 Скрининга при предгравидарной подготовке.
6. 6 В качестве дополнения к микроскопическому исследованию для оценки состояния биоценоза здоровых женщин.
7. 7 Подтверждения диагноза « » с определением факультативной флоры с патологическим характером роста.
8. 8 Контроля эффективности терапии.
9. 9 Мониторинга восстановления нормальной флоры.

Противопоказаний к проведению анализа нет. Единственным условием является правильное выполнение забора и транспортировки исследуемого материала.

Для уточнения этиологии гинекологических заболеваний иногда необходимо дополнительно анализировать наличие абсолютных патогенов (хламидии, гонококки, трихомонады) с помощью метода ПЦР.

Наличие данных микроорганизмов исследуется в формате реактивов «Фемофлор Скрин», куда дополнительно входит определение:

1. 2 Herpesvirus 1
2. 5 Citomegalovirus
3. 6 Herpesvirus 2

Когда и какой Фемофлор назначается, рассмотрим ниже.

9.1. Фемофлор 4

Проводится оценка общего состояния биоценоза. Целесообразно применять при симптомокомплексах вульвовагинального кандидоза, либо с целью оценки эффективности проведенной терапии.

9.2. Фемофлор 8 (Фемофлор 9)

Проводится более расширенная оценка состояния биоценоза. Также применяют при симптомах кандидоза, бактериального вагиноза, а также с целью оценки качества проведенных лечебных мероприятий, неспецифического вагинита.

9.3. Фемофлор 16 (Фемофлор 17)

Детально анализируется состав флоры. Назначается при хронических рецидивирующих инфекционных процессах, при предгравидарной подготовке, подготовке к операциям, гистероскопии, ЭКО, введению ВМС, а также для оценки качества проведенной терапии.

9.4. Фемофлор Скрин

Дополнительно анализируется наличие специфической инфекции и вирусов. Назначается при явлениях специфической инфекции (гонорея, ), генитальном герпесе, вторичном бесплодии, наличии спаечных процессов в малом тазу, патологии беременности, при предгравидарной подготовке, и цервицитах.

10. Правила забора и транспортировки материала

Для исследования необходимо взятие соскоба из задне-бокового свода влагалища, цервикального канала или уретры.

До забора предварительно следует ознакомить женщину с некоторыми нюансами подготовки к исследованию:

1. 1 Необходимо закончить курс терапии антибактериальными препаратами за 14 дней до исследования;
2. 2 Необходимо закончить курс терапии эубиотиками и пробиотиками за 14 дней до исследования;
3. 3 Исключить защищенные половые контакты непосредственно перед исследованием, незащищенные – за 48 часов до взятия соскоба;
4. 4 Исключить применение тампонов за сутки до забора материала;
5. 5 Выждать 48-часовой промежуток после кольпоскопии и трансвагинального УЗИ.

10.1. Забор из заднебокового свода

Перед осуществлением забора женщина НЕ должна проводить гигиенические процедуры и спринцевания, вводить лекарственные и антисептические свечи.

Материал представляет собой соскоб эпителиальных клеток. Чаще всего забор из заднебокового свода берется для оценки биоценоза влагалища.

Производится во время осмотра влагалища в зеркалах, строго ДО мануального исследования. Важным условием является отсутствие патологической слизи, крови из места забора, при необходимости – их механическое удаление стерильным ватным тампоном. При неправильном взятии соскоба и результат анализа будет недостоверным.

Соскоб берут специальным одноразовым зондом, который затем помещают в пробирку с питательной средой (1,5 мл «Эппендорф» с питательной средой), тщательно его прополаскивают в среде, затем зонд утилизируют.

Пробирку обязательно маркируют и плотно закрывают крышкой.

10.2. Забор из цервикального канала

Обычно проводится при подозрении на патологию шейки матки (цервицит). Если патологический процесс виден в зеркалах, то рекомендуется брать материал именно из этого участка.

Важным условием забора является отсутствие посторонних примесей и слизи, которые можно ликвидировать простерилизованным ватным тампоном, после чего шейка обрабатывается стерильным раствором 0,9% натрия хлорида.

В цервикальный канал вводят специальный зонд на глубину не более 1,5 см, круговым движением очерчивается полный круг, после этого зонд извлекается. На данном этапе важно не задеть стенки влагалища (результат может быть недостоверным).

10.3. Забор отделяемого мочеиспускательного канала

Уретру, а точнее ее наружное отверстие, предварительно смачивают стерильным раствором 0,9% раствором натрия хлорида, после этого можно производить забор материала.

Если у пациентки имеются обильные специфические (гнойные или слизистые) выделения, двухчасовой интервал между последним мочеиспусканием и временем забора материала можно не соблюдать.

Зонд вводится на глубину 1-1,5 см одним движением, а затем извлекается без каких-либо дополнительных манипуляций.

После забора материала для исследования пробирка маркируется, к ней прикрепляется направление, в котором указывается предварительный диагноз, дату последней менструации или причину ее отсутствия (менопауза, аменорея).

Транспортировка осуществляется специально обученным лаборантом. Допускается замораживание материала при температуре -20 С на срок не более 1 месяца.

Транзиторные микроорганизмы (непатогенные, условно-патогенные, патогенные) случайно заносятся в генитальный тракт из окружающей среды. В условиях нормального биотопа они пребывают во влагалище короткое время и быстро удаляются с током слизи и за счет деятельности мукоцилпарного эпителия. В случае нарушения защитных механизмов патогенные или условно-патогенные микроорганизмы транзиторной или факультативной флоры прикрепляются к клеткам влагалищного эпителия (адгезия) с последующим размножением и повреждением тканей (воспалительная реакция).

Влагалищная микрофлора строго индивидуальна и меняется в различные периоды развития женского организма. Понятие нормы различается не только в связи с возрастом, но и в связи с принадлежностью к разным этническим группам и даже географическим местом обитания.

Особенностью нормальной микрофлоры половых путей здоровых женщин репродуктивного возраста является многообразие видового состава, представленного широким спектром микроаэрофилов, факультативных и облигатных анаэробных микроорганизмов (соотношение «анаэробы/аэробы» в репродуктивном периоде составляет 10: 1).

Ведущее место в вагинальном микробиоценозе - 95-98 % (10 7 -10 9 КОЕ/мл) - занимают лактобациллы (палочки Додерлейна), чаще всего это микроаэрофильные, продуцирующие перекись водорода, реже анаэробные.

Кроме влагалища различные виды лактобактерий колонизируют и дистальный отдел уретры. Комбинации видов отличаются у разных женщин.

Лактобациллы играют большую роль в поддержании нормального биоценоза влагалища за счет высокой конкуренции и антагонизма по отношению к патогенным и условно-патогенным бактериям. Защитные функции лактобактерий объясняются способностью продуцировать перекись водорода, лизоцим, что губительно влияет на патогенную флору. Кроме того, лактобациллы обладают свойством высокой адгезии к вагинальным эпителиоцитам, препятствующей колонизации патогенов и ограничивающей излишнюю пролиферацию условно-патогенных бактерий влагалища. Однако основным механизмом, обеспечивающим колонизационную резистентность вагинального биотопа, является способность лактобактерий к кислотообразованию. В результате деятельности лактофлоры из гликогена вагинального эпителия образуется молочная кислота, что и определяет кислую реакцию содержимого влагалища (рН 3,8-4,5).

Бифидобактерии, входя в состав микроценоза влагалища, также являются кислотопродуцирующими микроорганизмами, вырабатывающими, кроме того, бактериоцины, лизоиим, спирты.

Качественный и количественный состав влагалищной микрофлорыподвержен различным изменениям: так, например, в течение менструального цикла в связи с колебаниями в секреции половых гормонов дни доминирования лактобапилл сменяются днями преобладания гарлнерелл и бактероидов. Изменения вагинального биотопа и рН содержимого влагалища наблюдаются во время менструации за счет излития менструальной крови, а также после полового акта из-за щелочной реакции спермы. На состав микрофлоры влагалища, как качественный, так и количественный, могут оказывать воздействие особенности туалета половых органов, степень половой активности, а также всевозможные способы контрацепции. Снижение концентрации лактобацилл происходит при использовании внутриматочных контрацептивов, антибиотиков, антибактериальных веществ, после хирургических вмешательств, при наличии опухолевых процессов и др.

Деятельность всех биотопов, в том числе и влагалищного, регулируется эндокринной, нервной и иммунной системами, которые действуют как единое целое. Поломка в одном из этих звеньев неизменно вызывает нарушение микроэкологии влагалища, которое в дальнейшем может привести к развитию воспалительных процессов генигальпого тракта.

Плод, находясь в утробе матери, стерилен. Первичная контаминация вагинальной микрофлорой организма ребенка происходит во время родов при прохождении через естественные родовые пути. В норме влагалище новорожденных девочек в первые часы жизни стерильно. В течение первых суток влагалище девочки заселяется лактобациллами, а также другими аэробными и факультативно-анаэробными микроорганизмами из кишечника. Под влиянием материнских эстрогенов клетки вагинального эпителия накапливают гликоген, который расщепляется до лактата, создавая кислую среду. В этот период микрофлора влагалища у новорожденных девочек имеет сходство с микрофлорой здоровых взрослых женщин. Через 3 недели материнские эстрогены полностью метаболизируются, эпителий становится тонким.

Оценка степени чистоты влагалища (по А.F.М. Неиrlеin, 1910)

Количество лактобактерий во влагалище снижается, кислая среда сменяется нейтральной, в микрофлоре начинают доминировать анаэробы, микробное число уменьшается. В пубертатный период с момента активации овариальной функции и появления эндогенных эстрогенов увеличивается толщина эпителия влагалища, повышается число рснепторпых участков для адгезии лактобактерий. Лактобациллы становятся доминирующими микроорганизмами во влагалише. Метаболизм лактобактерий способствует стабильному сдвигу рН вагинального содержимого в кислую сторону.

С всуплением женщины в период постменопаузы в генитальном тракте существенно снижаются уровни эстрогенов и, соответственно, гликогена. Значительно уменьшается общий уровень бактерий, прежде всего лакто- и бифидобактерий. Качественный состав микрофлоры становится скудным, с преобладанием облигатно-анаэробных бактерий. В этот период рН вагинальной среды приобретает нейтральные значения.

В просвете влагалища в норме ежесуточно скапливается 0,5-2.0 мл жидкости, представляющей собой секрет цервикальных желез, эндометрия и эпдосальпинкса, а также транссудат кровеносных и лимфатических сосудов. Вагинальная жидкость содержит органические и неорганические вещества. Среди электролитов обнаруживаются К + , Na + , Mg 2+ СГ, из микроэлементов важное значение в метаболизме принадлежит железу, меди, кобальту, никелю. Содержание белка невелико: он представлен альбумином, иммуноглобулином классов А, G, М (продуцируются плазматическими клетками и лимфоцитами в экто- и эндоцервиксс), трансферриyом, лактоферрином, лизопимом, ферментами. Все белковые соединения выполняют регулирующую роль в поддержании гомеостаза. Сложные углеводы вагинальной слизи связывают лиганды бактерий и препятствуют адгезии бактерий на поверхности эпителиоиитов. Кроме того, в состав вагинальной жидкости входят аминокислоты, мочевина, глюкоза, молочная, уксусная кислоты, холестерин, триглицериды, перекись водорода и др.

Чрезвычайно важными являются защитные свойства влагалищной жидкости, обусловленные иммунологическими механизмами. Помимо иммуноглобулинов их обеспечивают иммунокомпетентные и макрофагальные клетки (лимфоидные, макрофаги, интраэпителиальные клетки Лангерганса, лимфоциты, нейтрофилы и др.). Количественный и качественный состав вагинальной жидкости изменяется при различных заболеваниях, применении антибиотиков, гормональном стрессе, связанном с абортом, влиянии неблагоприятных факторов внешней среды.

Для оценки состояния микрофлоры влагалища А.F.М. Неurlein (1910) предложил бактериологическую классификацию четырех степеней чистоты влагалища с учетом количества лейкоцитов, эпителиальных клеток, лактобацилл. Однако для оценки состояния микроэкологии влагалища правильнее использовать не термин «степень чистоты», а термин «степень загрязнения». С современных позиций классификация не отражает многообразие видового состава вагинальной микрофлоры, взаимоотношения микроорганизмов, хотя широко используется и в настоящее время. За рубежом для оценки состояния микробиоценоза влагалища применяется классификация О. Jirovec et al.

Степень чистоты влагалища (по О. Jirovec et al., 1948):

1. Мазки здоровых женщин: эпителиальные клетки и палочки Долерлейна.
2. Негнойный бактериальный кольпит: обнаружение многочисленных негноеродных бактерий без лейкоцитов.
3. Гнойный бактериальный кольпит: обнаружение многочисленных гноеродных микробов и лейкоцитов.
4. Гонококковая инфекция: мазки, содержащие гонококки.
5. Трихомонадная инфекция: картина трихомониаза.
6. Кандидоз: картина влагалищного микоза.

Однако и эта классификация не лишена недостатков и, по сути, отражает варианты вагинитов различной этиологии.

С учетом современных достижений клинической бактериологии и знаний инфекционной патологии женских половых органов Е.Ф. Кира в 1994 году была разработана оригинальная классификация микроскопической характеристики биоценоза влагалища, в которой представлены микроскопическая характеристика 4 типов биоценоза влагалища и соответствующие каждому типу нозологические формы:

1. Нормоценоз , характеризующийся доминированием лактобактерий, отсутствием грамотрицательной микрофлоры, спор и мицелия дрожжеподобных грибов, наличием единичных лейкоцитов и чистых эпителиальных клеток. Подобная картина отражает типичное состояние нормального биотопа влагалища.
2. Промежуточный тип - умеренное или сниженное количество лактобактерий, наличие грамположительных кокков, грамотрицательных палочек. Обнаруживаются лейкоциты, моноциты, макрофаги, эпителиальные клетки. Является пограничным типом, часто наблюдается у здоровых женщин, редко сопровождается жалобами и клиническими проявлениями.
3. Дисбиоз влагалища , выражающийся в незначительном количестве или полном отсутствии лактобактерий, обильной полиморфной грамотрицателыюй и грамположительной палочковой и кокковой микрофлоре, наличии ключевых клеток. Количество лейкоцитов вариабельно, отмечается отсутствие или незавершенность фагоцитоза. Соответствует микробиологической картине бактериального вагиноза.
4. Вагинит (воспалительный тип мазка) - полимикробная картина мазка с большим количеством лейкоцитов, макрофагов, эпителиальных клеток; отмечается выраженный фагоцитоз.

Таким образом, нозологической формой дисбиоза влагалища является бактериальный вагиноз. По определению А.С. Анкирской (2005), бактериальный вагиноз - это инфекционный невоспалительный синдром, характеризующийся резким снижением или отсутствием лактофлоры и ее заменой на полимикробные ассоциации анаэробов и гарднерелл. Это частое инфекционное заболевание влагалища, которое встречается у 21-33 % женщин репродуктивного возраста и не относится к инфекциям, передающимся половым путем.

В настоящее время хорошо изучен характер нарушений влагалищного биоценоза при бактериальном вагинозе, представляющий собой снижение количества лакто- и бифидобактерий (особенно образующих перекиси) с бурной пролиферацией бактерий Gardnerella. vaginalis, Micoplasma hominis, и прежде всего анаэробов Bacteroides spp. Prevotella spp. Mobiluncus spp. Peptostreptococcus spp. Fusobacterium spp. и др. При этом происходит повышение рН вагинального содержимого. Анаэробы начинают активно синтезировать летучие амины, имеющие неприятный, так называемый аминовый, запах гнилой рыбы.

Предрасполагающими к заболеванию факторами являются:

· применение антибактериальных препаратов, в том числе антибиотиков;

· прием оральных контрацептивов или длительное использование внутриматочной контрацепции;

· гормональные нарушения, сопровождающиеся клиникой гипомепструального синдрома;

· перенесенные в прошлом воспалительные заболевания половых органов;

· гинекологические лечебно-диагностические манипуляции;

· эндокринопатии (сахарный диабет, гипотиреоз);

· изменения и нарушения гормонального статуса (беременность, роды, дисмснорея, пубертат, климактерический период, лактация);

· частая смена половых партнеров;

· нерациональная интимная гигиена;

· стрессовые ситуации, смена климатической зоны;

· лечение цитостатиками, рентгенотерапия, ионизирующее излучение;

· снижение иммунитета и др.

Клиническое значение бактериального вагиноза в настоящее время является неоспоримым, поскольку нарушение микроэкологии влагалища значительно повышает риск возникновения воспалительных заболеваний половых органов, в том числе послеродовых, самопроизвольного аборта, преждевременных родов, хориоамнионита, внутриутробного инфицирования плода, послеоперационных инфекционных осложнений.

Клинические проявления не имеют специфических признаков. Основной жалобой больных являются обильные однородные кремообразные вагинальные выделения серого цвета, которые прилипают к стенкам влагалища и имеют неприятный «рыбный» запах. Возможно появление зуда, жжения в области влагалища, дискомфорт во время полового акта.

Диагноз бактериального вагиноза ставится на основании выявленных хотя бы трех из четырех критериев, предложенных К. Аmsel (1983):

· наличие специфических вагинальных выделений;

· обнаружение ключевых клеток во влагалищном мазке (слущенные клетки плоского эпителия, к поверхности которых прикреплены грамвариабельные микроорганизмы);

· значение рН влагалищного содержимого выше 4,5;

· положительный аминовый тест.

Для коррекции нарушенного микробиоценоза традиционно проводится двухэтапная терапия. Первый этап заключается в санации влагалища от патогенных и условно-патогенных анаэробных микроорганизмов (этиотропная терапия): орнидазол. метронидазол, клиндамицин, тержинан. макмирор предпочтительно местно или системно в среднем от 3 до 10 дней. Второй этап не менее значим - он сводится к восстановлению нормального биоценоза влагалища. С этой целью в течение 5-7 дней местно назначаются различные кислотообразующие эубиотики (биопрепараты): лактобактерин, бифидобактерин, аиилакт, жлемик. Однако существующие пробиотики местногоприменения содержат лакто- и бифилобактерии кишечного происхождения, которые не способны эффективно приживаться во влагалище из-за низких адгезивных свойств по отношению к влагалищным эпителиопитам. В результате этого лечение может привести к нестойкому клиническому эффекту.

Фармацевтической компанией «Ядран» (Хорватия) выпускается препарат Лактогин (в Украине - Вагисан) - первый в мире пероральный пробиотик для восстановления нормальной микрофлоры во влагалище, содержащий комбинацию уникальных штаммов в дозе 10 4 КОЕ. Эти микроорганизмы выделены из влагалища и дистальных отделов уретры здоровых женщин. Они легко колонизируют влагалище после перорального приема,способны продуцировать бактерициноподобные вещества, перекись водорода, обладают антиграмотрицательной и антиграмположительной активностью в отношении кокковой флоры. Прием Лактогина (Вагисана) приводит к восстановлению вагинальной флоры в 82 % случаев.

Препарат выпускается в виде капсул. Желатиновая капсула защищает лактобациллы от воздействия желудочного сока и желчных кислот. В тонком кишечнике происходит растворение капсулы и выход лактобацилл в просвет кишки. Совершая пассаж по кишечнику, они сохраняют свою жизнеспособность. После этого вследствие анатомической близости анального отверстия и преддверия влагалища лактобактерий легко проникают во влагалище, колонизируют его и дистальные отделы уретры. Пробиотические штаммыLactobacillus rhamnosus GR-1 и Lactobacillus reuteri RC-14 способны подавлять рост и адгезию патогенных микроорганизмов. Эффективность и безопасность препарата подтверждена многочисленными клиническими исследованиями.

Для восстановления здоровой вагинальной микрофлоры и профилактики рецидивов заболевания препарат рекомендуется принимать по 1 капсуле в день во время еды, запивая водой, а в комплексной терапии хронических воспалительных заболеваний половых органов - но 1 капсуле 2 раза в день. Улучшения качества вагинальной флоры следует ожидать через 2 недели с момента начала терапии. Безопасность препарата подтверждена в ходе многочисленных клинических исследований.

Инфекция - результат взаимодействия организма человека и микроба (вирус, бактерия, простейшие, грибы, др.), при котором микробы размножаются в организме человека и вызывают у него ответную реакцию - воспаление, изменение анализов крови, различные жалобы.

Инфекции всегда вызваны чужеродным микроорганизмом. Т.е. у любой инфекции всегда есть возбудитель . Если вам ставят «просто» воспаление придатков то и в этом случае так же существует возбудитель, которого можно определить.

Гинекологические инфекции можно условно разделить на 3 группы:

1. Венерические заболевания - передаются только половым путем и вызывают заболевания именно половых органов. Передаются от человека человеку.
   Гонорея, сифилис, мягкий шанкр, паховый лимфогранулематоз. - если они есть - ими заразились, только от человека и только половым путем
2. Заболевания, передающиеся половым путем (ЗППП, ИППП) - вызываются возбудителями, которые передаются НЕ ТОЛЬКО половым путем, но и (иногда даже чаще) - с кровью, и бытовым, иногда воздушно-капельным, контактным. Половым путем они тоже передаются, потому так и называются - т.е. при половом акте ими заразиться МОЖНО.
   ВИЧ-инфекция, вирусные гепатиты В,С,Д,Е, трихомониаз, хламидиоз, папилломавирусная инфекция, генитальный герпес - если они есть - ими заразились от другого человека, не обязательно половым путем, может быть от матери в детстве, может быть в бассейне на общей лавке, может быть через кровь.
3. Возбудители, которые тоже передаются половым путем, но чаще приходят в половые пути из собственных соседних органов, через грязные руки и др. способами, не называются возбудителями ЗППП (из психологических соображений, чтобы не травмировать психику пациентов, иногда даже вообще не ведущих половую жизнь, а страдающих этими инфекциями), при этом очень часто являются возбудителями воспалительных заболеваний органов малого таза (ВЗОМТ) у мужчин и женщин (кольпит, эндометрит, бартолинит, простатит и тд).
   Кишечная палочка, энтерококки (кишечная и простатическая флора), стафилококки (руки), стрептококки (хронический тонзиллит) и др. - если они есть, вы не обязательно ими заразились, даже если они попали к вам от другого человека. Например, у полового партнера они были нормальной флорой, а попав к вам, были восприняты как чужеродные бактерии и вызвали воспалительный процесс. Также возможно, что они пришли из недолеченных гланд, зубов и т.п. Лечатся как ЗППП.

На последней группе инфекций, как вызывающей наибольшее количество вопросов, стоит остановиться немного подробнее.

Воспалительный процесс - это набор жалоб и изменений в анализах, которые вызваны чужеродными микробами, возбудителями инфекций. Когда говорят «у вас нет инфекций, просто воспаление», имеют в виду, что воспаление вызывается не только венерическими заболеваниями, а всем вышеперечисленными микробами, т.о. воспаление может быть у девственниц, при воздержании, при строгой моногамности и тд - и это все равно инфекция, со всеми вытекающими принципами лечения. Т.е. фраза «не инфекция, а просто воспаление» - чисто психологическая тавтология, и не основание менять антибиотики на неэффективные свечи. Т.о. чтобы не было обид на слово «инфекция» - откуда? У меня!!! Муж - мой единственный партнер… Говоря «инфекция» и даже «ЗППП», врач не подразумевает венерическое заболевание и не намекает на вашу беспорядочную половую жизнь. Обычная кишечная палочка с грязных рук - тоже вызывает инфекцию. А она же могла передаться обычным половым путем из простаты мужа. Или при оральном сексе - изо рта. В этом случае она - классический возбудитель ЗППП, хотя и не маркер заражения от неизвестного третьего партнера. Резюме - диагноз «Инфекция» - не повод обвинять друг друга в измене или при уверенности друг в друге - не повод не доверять врачу, обижаться и не выполнять полностью лечебную схему. И при этом чаще всего «откуда» инфекция, вызвавшая жалобы в половой сфере? - от половой жизни. Пусть и моногамной.

Два наиболее распространённых состояния, у относительно здоровых женщин, - это молочница (кандидоз) и б актериальный вагиноз (дисбактериоз, дисбиоз влагалища).

Молочница

Женщины сами ставят себе такой диагноз, когда их беспокоят выделения. А врачи гинекологи под молочницей понимают строго определенное заболевание, вызванное известным возбудителем - грибком рода Кандида . Но выделения, зуд и жжение вызываются не только грибками. Такие же симптомы воспаления влагалища (кольпита) возможны при гонорее, трихомониазе, бактериальном вагинозе (гарднереллезе), генитальном герпесе, хламидиозе, микоплазмозе, уреаплазмозе и др. инфекциях. Поэтому когда беспокоят описанные жалобы, нужно идти к врачу на обследование и выяснять возбудителя, а не заниматься самолечением, т.к. рекламируемые препараты эффективны только против настоящей молочницы - кандидоза.

Кандидоз не относится к числу классических заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), это внутреннее состояние, причиной которого, чаще всего, является снижение иммунитета. Поэтому при длительно текущем, рецидивирующем, плохо поддающемся лечению кандидозе необходимо искать патологию в организме, которая может вызывать иммунодефицит, проявляющийся, в частности, кандидозом.

При обнаружении кандидоза помимо назначения антигрибковых препаратов нужно обследовать организм, найти первопричину иммунодефицита, принять меры к повышению иммунитета.

Лечение должны пройти одновременно оба партнера , т.к. это заболевание передается половым путем, даже если первоначально возникает как признак иммунодефицита. Яснее: если у Вас кандидоз, это не значит, что Вас кто-то заразил, но это значит, что Вы можете заразить другого.

Биоценоз в гинекологии - это совокупность всех видов бактерий, живущих на слизистых оболочках женских половых органов (влагалище, матка, яичники, вульва). Больше всего представителей микрофлоры находится во влагалище. Мазок на биоценоз показывает состав микрофлоры, включающей полезные бактерии и патогенные микроорганизмы.

Стоимость анализа - 2600 руб.

Зачем сдавать мазок на биоценоз

Стерильным влагалище женщины бывает лишь первые несколько часов жизни после появления на свет. Потом его начинают заселять различные микроорганизмы. Полезные бактерии образуют на слизистой защитную биоплёнку, препятствующую проникновению внутрь болезнетворных бактерий и поддерживающую местную иммунную систему для сохранения детородной функции. При нарушении количественного и качественного состава биофлоры, слизистую заселяют патогены, вызывающие гинекологические заболевания.

В результате женщина чувствует боль, зуд, неприятный запах, развивается воспаление, приводящее к серьезным осложнениям, например, к бесплодию.

Симптомы заболеваний, вызванных смещением норм в составе флоры ( и т.д.), проявляются не сразу. Поэтому гинекологи берут мазок на биоценоз перед любой процедурой, чтобы не занести инфекцию, например, при . Также необходимо сдать мазок при подозрении на бесплодие и другие гинекологические заболевания.

Что представляет собой биоценоз влагалища

Микрофлора есть у каждой женщины, но она непостоянна по своему составу, и меняется на протяжении жизни. Организм женщины населяют следующие группы микрофлоры:

Грамположительные облигатно-анаэробные

Пропионобактерии, лактобактерии, клостридии, молочнокислые лактобактерии, пептострептококки.

Грамположительные бактерии чаще других являются возбудителями заболеваний. Грамположительными их назвали за способность впитывать синий краситель в клеточную стенку и сохранять фиолетовую окраску при промывке спиртовым раствором по методу Грама. Обозначается такая флора Грам (+).

К патогенам человека относят как минимум 6 родов грамположительных микроорганизмов. Кокки - стрептококки, стафилококки - имеют шаровидную форму. Остальные - похожи на палочки. Они в свою очередь делятся на не образующие споры: Corynebacterium, Листерия и образующие споры: Бациллы, Клостридии.

Грамотрицательные облигатно-анаэробные бактерии

Фузобактерии, бактериоиды, порфиромонасы, превотеллы, порфиромонасы, вейлонеллы). Они не окрашиваются в синий цвет во время теста Грама, не образуют споры, но в некоторых случаях являются возбудителями заболеваний и выделяют опасные для жизни токсины. Грамотрицательные бактерии относят к условно-патогенной флоре, которая активизируется и становится опасной лишь при определенных условиях, например, при резком ослаблении иммунитета.

Заболевания, вызванные грамотрицательными бактериями, сложно лечить, потому что они, имея толстую оболочку, устойчивы к антибиотикам.

Факультативно-анаэробные

Микоплазмы, грибок Candida (молочница), стрептококки, стафилококки, энтеробактерии. Они прекрасно адаптируются, поэтому могут существовать как в бескислородной среде, так и в присутствии кислорода. Некоторые из них, например, кандида, также относится к условно-патогенным микроорганизмам.

Лактобактерия - основная часть здоровой флоры

Важнейшая из всех бактерий - лактобактерия. Ее колонии составляют примерно 95% нормальной микрофлоры у здоровой женщины. Именно лактобактерия поддерживает высокий уровень противостояния биоценоза влагалища к инородным инфекциям.

Таким образом, нормальный биоценоз можно рассматривать как отсутствие грамотрицательных клеток и доминация лактобактерий. Количество анаэробных микроорганизмов к аэробным определяется пропорцией от 2:1 до 5:1.

Когда число лактобактерий уменьшается либо полностью исчезает, возникает бактериальный вагиноз. Это заболевание характеризуется преобладанием кокков, резким увеличением численности анаэробов.

Как меняется биоценоз на протяжении жизни женщины

Для определённого периода жизни женщины характерно доминирование той или иной группы микроорганизмов. У новорождённой малышки микроорганизмы во влагалище начинают появляться на второй день жизни. Полученные от матери гормоны эстрогены поддерживают кислую среду во влагалище. Его стенки выделяют гликоген - полисахарид, являющийся прекрасной средой для размножения молочнокислых бактерий (лактобактерий, бифидум бактерий).

Условно-патогенные микроорганизмы появляются после третьей недели жизни, потому что иммунитет, полученный от матери, постепенно ослабевает. Защитные свойства биоценоза девочки не отличаются стабильностью, поэтому важное значение играет девственная плева, не впускающая внутрь патогенную микрофлору.

В подростковом возрасте организм девушки сам вырабатывает эстрогены, поддерживающие оптимальную кислую среду во влагалище. Условно-патогенная микрофлора вымывается активно выделяющейся слизью. К 16 годам уже сформирован уникальный биоценоз, который сохраняется весь детородный период.

В возрасте от 16 до 45-50 лет (до наступления менопаузы) во влагалище здоровой женщины присутствует около 40 различных микроорганизмов, 95% которых относится к группе молочнокислых непатогенных, а 5% принадлежат к условно-патогенным.

В прекращается выработка женского гормона эстрогена, поддерживающего кислую среду влагалища. В этот период молочнокислые бактерии погибают, уступая место стафилококкам, кандидам, кишечным палочкам. Вот почему у пожилых женщин нередки случаи вагинита (воспаления стенок влагалища), молочница и дисбиоз.

Какой состав биофлоры влагалища считается нормальным

В норме в микрофлоре влагалища соотношение анаэробных к аэробным бактериям должно быть от 2:1 до 5:1. При воспалениях микрофлора меняется до показателей от 100:1 до 1000:1. Также в норме отсутствуют лейкоцитарные и эпителиальные клетки.

Нарушить нормальный биоценоз влагалища могут различные факторы:

• ослабление иммунитета ввиду стрессов или болезней, переохлаждение;
• гормональная перестройка (беременность, климакс, );
• длительное лечение антибиотиками;
• частая смена половых партнёров;
• диарея, дисбактериоз, авитаминоз;
• резкая смена климата;
• мочеполовые инфекции;
• синтетическое бельё, капроновые колготки (не пропускают воздух и создают условия для развития анаэробов), ежедневное использование прокладок.

Как понять, что биоценоз нарушен

Нарушение биоценоза встречается не только у взрослых женщин, но и у детей дошкольного возраста. В советское время все дети носили неэластичные колготки из хлопка, потому что другие изделия просто не продавались. Зато нарушение микрофлоры у девочки было редкостью

Сегодня все половозрелые женщины в той или иной степени испытали нарушение микрофлоры. Об отклонении биоценоза от нормы свидетельствуют следующие факты:

• творожистые или гелеобразные выделения из влагалища;
• неприятный резкий запах;
• жжение при мочеиспускании, зуд во влагалище;
• боли внизу живота как при менструации;
• ощущение дискомфорта во время секса.

Какой анализ на биоценоз самый информативный: мазок фемофлор 16

Один из самых эффективных анализов на выявление картины влагалищного биоценоза - Фемофлор-скрининг. Это методика основана на . Это метод молекулярной биологии, позволяющий выделять ДНК того или иного вируса, грибка или бактерии. В результате врач получает картину состава микроорганизмов к- патогенных и полезных.

Самым популярным является мазок на микрофлору, известный как Фемофлор 16. Он помогает выявить 16 бактерий, обитающих на стенках влагалища, и разделить здоровый микробиот и патогенные микроорганизмы. Этот анализ представляет собой соскоб со слизистых стенок влагалища.

У несовершеннолетних детей до 16 лет производить забор материала для изучения можно только под наблюдением взрослого. Беременным женщинам при сроке беременности больше 22 недель мазок на биофлору не берут из-за высокой вероятности осложнений.

Когда проводится процедура?

Исследование биоценоза влагалища назначается в тех случаях, когда необходимо:

• Определить состояние микрофлоры влагалища;
• Подтвердить или опровергнуть наличие следующих заболеваний: бактериальный вагиноз, нормоценоз, вагинальная атрофия, вагинальный кандидоз, неспецифический вагинит, промежуточный нормоценоз.

Подготовка к взятию мазка

Подготовка к исследованию включает в себя те же этапы, которые проводятся при подготовке к любой другой гинекологической процедуре. Материал сдается для изучения примерно на 5-7 день менструального цикла. Во время месячных взятие мазка не проводится из-за изменения заселенности влагалища микробной флорой по причине выделений крови.

Перед процедурой забора мазка женщина должна исключить половые контакты за 2 дня до посещения врача, не спринцеваться, не пользоваться ежедневными прокладками, мазями и пр. Результат исследования будет признан правильным, если количество эпителия в мазке будет приблизительно 105 ед., а общее число бактерий 106-108 ед.

Каких возбудителей выделяет анализ мазка на биоценоз и какие данные получают из анализа?

Результатом проведения исследования мазка на биофлору может стать определение таких микроорганизмов, как:

• Лактобактерии - основные представители нормального биоценоза;
• Условно-патогенные микроорганизмы: энтерококки, стрептококки, энтеробактерии, гемофилы, коринебактерии, грамотрицательные палочки, стафилококки, грибы рода кандида.

Проводя анализ мазка на биофлору, врач получает информацию:

• О росте патогенной микрофлоры либо ее отсутствии.
• О численности грибов, бактерий и лактобацилл;
• О степени чувствительности микроорганизмов к антибиотикам (при количестве >104 кое/тамп.).

Исследование на чувствительность микрофлоры к антибиотикам не проводится при росте и сопутствующей и условно-патогенной флоры в низком титре.

Что выявляет мазок на биоценоз - Фемофлор 16: показатели нормы и отклонения

По результатам анализа можно определить присутствие в организме патогенных бактерий. Увеличение содержания одной или нескольких условно-патогенных микроорганизмов говорит о воспалительном процессе, наличии инородного тела (миомы, кисты), ЗППП () и пр. Анализ Фемофлор проводится быстро и даёт моментальный результат. Т.о. за один раз врач может увидеть полную картину биоценоза женщины.

Как расшифровать результаты мазка: выявленные заболевания

Интерпретация полученных результатов всегда проводится гинекологом. Врач сравнивает полученные данные с результатами обследования другими методами и жалобами пациентки. Выделяют несколько состояний дисбиотического процесса влагалища:

Нормоценоз

Характеризуется обсемененностью в пределах 106-108 кое/тамп. Большая часть микрофлоры представлена лактобактериями. Условно-патогенная микрофлора (УПМ) полностью отсутствует либо наблюдается в низком титре (<104 кое/тамп.). При микроскопическом изучении клеток эпителия встречаются клетки поверхностного слоя, реже промежуточного. В некоторых случаях попадаются «ложноключевые» клетки.

Бактериальный вагиноз

При аэробных условиях не наблюдается рост микроорганизмов или отмечается слабый рост УПМ. Титр лактобактерий понижен (< 104 кое/тамп.). В микрофлоре влагалища присутствуют гарднереллы, анаэробы. Встречаются «ключевые клетки». Бактерии-лактоморфотипы полностью отсутствуют или определяются в малом количестве.

Вагинальный кандидоз

Подразделяется на кандидозный вагинит, бессимптомное носительство грибов и сочетание кандидозного вагинита с бактериальным вагинозом в зависимости от количества УПМ и грибов. При кандидозном вагините число всех микроорганизмов достигает 108 кое/тамп., грибов - >104 кое/тамп., лактобактерий - >106 кое/тамп. Эпителий представлен клетками разных слоев. В микрофлоре преобладают лактоморфотипы бактерии. Наблюдаются дрожжеподобные грибы и бластоспоры. Лейкоциты - 10-50 и больше в поле зрения.

Сочетание кандидозного вагинита и бактериального вагиноза

Характеризуется низким содержанием лактобактерий и отсутствием их роста. Присутствуют грибы и «ключевые клетки». Преобладают морфотипы, гарднереллы. Клетки эпителия разнослойные.

Бессимптомное носительство грибов можно определить увеличением количества лактобактерий и грибов. Эпителий представлен клетками поверхностных слоев. Слабо выражена лейкоцитарная реакция. Дрожжеподобные грибы не визуализируются или единичны в поле зрения.

Неспецифический вагинит

Заметно преобладает увеличение количества одного из представителей УПМ. Число лактобактерий резко уменьшается или равно нулю. Эпителий представлен разнослойными клетками. В микрофлоре доминируют грамположительные кокки или полиморфные палочки.

Цитологический вагиноз

В посеве отмечается увеличение количества лактобактерий в высоком титре (> 108 кое/тамп.). Клетки эпителия представлены в распавшемся виде. Рост патогенной микрофлоры не отмечается. Лактоморфотипы визуализируются в большом количестве.

Вагинальная атрофия

Условно-патогенная микрофлора и лактобактерии отсутствуют. Эпителий при глубоком изучении представлен клетками промежуточных слоев. Это зависит от степени проявления атрофии. Микрофлора практически отсутствует или встречается в виде единичных случаев. Число лейкоцитов - 10-15 в поле зрения.

Промежуточный микроценоз

Характеризуется снижением числа лактобактерий, отсутствует рост микрофлоры. Эпителий представлен поверхностными клетками. Лейкоцитов не более 10 в поле зрения, попадаются «ключевые клетки». Количество микрофлоры умеренное. Преобладают анаэробы.

Где сдать мазок на биоценоз (биофлору) в Санкт-Петербурге

Сдать такой анализ можно в г , Мы работаем без выходных и обеда, поэтому Вы сможете выбрать удобное для посещения врача время. Консультация по результатам анализа стоит всего 500 руб. и проводится по желанию пациентки. Результат мазка выдается на руки или направляется по электронной почте.